Анализы на вирус герпеса: плюсы и минусы существующих видов исследования

Виды анализов на герпес

Герпес – это инфекционное вирусное заболевание. Иммунитет человека устроен так, что при попадании в организм инфекций, паразитов и прочих «чужих» представителей, начинают вырабатываться защитные белковые соединения, то есть антитела. Для всех типов герпесов формируются специфические антитела, которые обнаруживаются в анализах крови. Другие виды исследования позволяют определить локализацию активного вируса, его количество.

Какие анализы сдают на генитальный герпес:

1. Кровь на Ig М при подозрении на недавнее заражение или на Ig G при диагностировании хронической инфекции. Информативнее сдавать суммарный тест на оба вида антител. По этим анализам обнаруживается иммунный ответ к инфекции, то есть «след» заболевания.
2. Анализ крови на авидность к генитальному ВПГ-2 позволяет предположить долю вероятности заражения вирусом месяц назад или раньше.
3. Анализ ПЦР мазка из урогенитального тракта показывает наличие или отсутствие ВПГ на момент исследования, то есть оценивается в режиме реального времени.
4. Метод РИФ исследует свечение, которое дает вирус герпеса.

При разных ситуациях врач направляет на анализ крови или исследования мазка. Тактику обследования при генитальном герпесе определяет гинеколог или инфекционист.

Анализ крови на ПЦР

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Этот метод молекулярной биологии направлен на выявление ДНК или РНК возбудителя.

Используется для диагностирования активной фазы заболевания, то есть когда вирус размножается и растет не в клетке, а за ее пределами, и способен нанести вред организму.

Для выявления герпеса исследуются различные биологические вещества. Врач может назначить анализ на ПЦР с любых слизистых оболочек (конъюнктива, ротоглотка, верхние дыхательные пути, уретра, влагалище, цервикальный канал и т.д.), сыворотки или цельной крови. При необходимости лаборатории могут исследовать методом ПЦР ликвор (спинномозговую жидкость) и другой биоматериал, полученный при хирургическом проколе органа.

Заключение анализа может быть качественным (обнаружен / не обнаружен) или количественным, то есть сколько копий найдено в условной единице биоматериала. Количественный результат необходим врачу для подбора соответствующей дозы лекарства.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) основан на специфической реакции «антиген – антитело». Метод обнаруживает различные низкомолекулярные соединения, которые образовались в организме в ответ на инфекцию. Обнаруженная специфическая молекула называется антителом и входит в состав иммуноглобулина, выработанного при инфицировании герпесом.

В первые 2 недели образуются Ig А или М. Срок их нахождения в крови – около 1-2 месяцев. Постепенно они замещаются Ig G, которые обычно диагностируются со второго месяца болезни. Их титр нарастает при длительном рецидивирующем герпесе. Сроки жизни антител примерные, зависят от индивидуальности иммунитета.

Анализ проводится из сыворотки крови. Сначала у пациента берут венозную кровь, отстаивают ее и откручивают в центрифуге.

При генитальном герпесе назначается ИФА на Ig М и G к ВПГ-1 и 2. Этим способом диагностики герпетической инфекции врач пользуется для определения первичного заражения и хронического течения. По снижению количества иммуноглобулинов специалист может судить о благополучном лечении. При рецидиве болезни титр антител возрастает.

РИФ (реакция иммунофлюоресценции)

Это экспресс-метод для обнаружения антигена или антител. Анализ основан на способности специфической сыворотки светиться в ультрафиолете при соединении с вирусом. Информативность метода менее 50%. Это устаревший способ диагностики, который в современной медицине используется крайне редко.

Если герпес появился на губах, то для первичной быстрой диагностики можно использовать слюну. Методом РИФ можно обнаружить флюоресцентное свечение при добавлении в слюну специального реактива на выявление ВПГ-1. Чтобы поставить окончательный диагноз, необходимо выявить герпес в организме методом ПЦР.

Другие методы диагностики герпеса

При установлении у пациента диагноза ВПГ, инфекционного мононуклеоза или цитомегаловируса, необходимо периодически сдавать анализы для оценки динамики течения.

После приема антибиотиков или противовирусных препаратов до анализа должно пройти 7-14 дней, если врачом не оговорено исследование на фоне лечения.

При необходимости выяснить, как давно произошло заражение, врач назначает анализ на авидность к герпесу. Авидность можно определить к ВПГ 1, 2, к ВЭБ или к ЦМВИ.

Рецидивирующий и первичный герпес у взрослых

Рецидивирующий герпес развивается в 30–50% случаев у носителей простого герпеса. Он может проявляться по-разному: иногда пациенты обращаются к неврологам, отоларингологам по поводу сильных болей в области тройничного нерва, ушах. При рецидивирующем генитальном герпесе может развиться тазовая невралгия. Обострения могут быть спровоцированы как переохлаждением, так и перегревом, инсоляцией («солнечный» герпес у отдыхающих в жарких странах), психической или физической травмой, вследствие косметических процедур, стоматологических манипуляций, гинекологических операций, приемом алкоголя. У женщин обострения герпеса часто связаны с лютеиновой фазой менструального цикла, это так называемый «менструальный» герпес. Частота и интенсивность обострений зависят от вирулентности и патогенности возбудителя, а также от сопротивляемости организма. Во время рецидивов отмечается общая слабость, недомогание, может повышаться температура тела, болеть и увеличиваться лимфатические узлы. Характерные высыпания в виде пузырьков сопровождает сильный зуд, покалывание, покраснение.

Если говорить о рецидивирующем генитальном герпесе, можно отметить то, что он трудно поддается терапии, имеет хроническое течение. Болезнь нарушает репродуктивную функцию и ощутимо снижает качество жизни. Локализация поражения на половых органах определяется “входными воротами” инфекции. У мужчин высыпания обычно локализуются в области крайней плоти, венечной борозды, ладьевидной ямки. Реже поражаются головка и тело полового члена, кожа мошонки. У женщин герпетические высыпания могут появляться на больших и малых половых губах, слизистой оболочке влагалища, шейке матки, в промежности, на ягодицах. Женщины отмечают периодические тянущие боли внизу живота, в области проекции яичников, отдающие в поясницу и прямую кишку, боли в промежности. Мужчины указывают на периодические боли в промежности, тянущие ощущения в мошонке, в теле полового члена.

Пациенты с рецидивами герпеса обнаруживают склонность к простудным заболеваниям, периодически ощущают слабость, недомогание, субфебрильную температуру, чаще испытывают депрессивные состояния. Врач может предположить герпес, если за несколько месяцев до этого пациент начал половую жизнь, сменил полового партнера или были какие-либо медицинские вмешательства. Первичный герпес у взрослых ВПГ-I обычно проявляется как острая инфекция верхних дыхательных путей: герпетический фарингит или тонзиллит.

Влияние простого герпеса на беременность

Часто герпес сочетается с бактериальным вагинозом или с другими ЗПП. Есть данные, по которым ГГ у 80% женщин протекает атипично без классической симптоматики. Пациентки жалуются на стойкий зуд в области вульвы, серозные бели, что может стать предпосылкой к постановке такого диагноза, как, например, вагинит или цервицит. Имея возможность купить любые антибактериальные свечи, женщины стремятся самостоятельно снизить воспаление, однако это лишь усугубляет проблему, так как герпес при этом не лечится. Герпетическая инфекция становится частой причиной невынашиваемости беременности, также является ко-фактором в развитии заболеваний малого таза. В особый класс выделяется изучение влияния герпеса на качество ооцитов и, соответственно, жизнеспособность зародыша. При рецидиве инфекции во время беременности повышается количество провоспалительных факторов, которые являются триггером к преждевременным родам.

Герпес на губах

Все типы герпеса вызывают системное заболевание, причем патологический процесс затрагивает не только кожу и слизистые оболочки. Герпес у детей и ослабленных взрослых может давать ухудшение общего состояния. Распространенный herpes labialis (лабиальный герпес) вызван вирусами герпеса 1-го и 2-го типов, он может повторяться несколько раз в год. Манифестация болезни происходит на фоне снижения иммунитета, переохлаждения, травмы, стресса. Лабиальный герпес начинается с покалывания на губах, затем проявляется пузырьковой сыпью, которая быстро превращается в небольшие болезненные эрозии, сопровождается отеком, покраснением, зудом.

Анализы на вирус герпеса у беременных

Прежде чем запланировать беременность, женщине рекомендовано обследоваться на генитальный герпес, так как болезнь в таком случае может быть крайне опасна для плода. Из наиболее частых осложнений выделяют детский паралич церебрального течения с умственной отсталостью. При выявлении герпесного возбудителя необходимо сначала пройти медикаментозный курс и только потом планировать беременность.

Особой опасностью обладает рецидив либо первичное заражение в первые 12-ть недель беременности, в момент формирование плода. Если клиническая картина стертая, но имеется подозрение на развитие болезни, то следует сделать анализ ИФА. Высокие количественные титры будут говорить о первичном инфицировании либо рецидиве.

Кроме того не каждая женщина знает, что существует менструальная форма простой герпесной инфекции, когда рецидивы возникают каждый месяц за 2-5 суток до кровотечений. Врачи связывают такое течение болезни с усиленным синтезом прогестерона в этот момент, который подавляет работу иммунной системы. Именно этот факт должен учитываться в то время, когда проводится анализ на герпес при беременности.

Беременной женщине следует уделять особое внимание любым проявлением инфекционных процессов. Ее здоровье напрямую влияет на полноценное формирование плода и будущее состояние ребенка.

Своевременное обращение к доктору при первой симптоматике, позволит предотвратить развитие осложнений у будущей матери и ее малыша. В период вынашивания ребенка иммунная система женщины очень ослаблена, поэтому постоянно подвержена проникновению различных вирусных агентов в организм. Для того чтобы избежать инфекции, беременной рекомендовано находится на свежем воздухе подальше от большого скопления людей. Кроме того очень опасно переохлаждение. Во многом от внимательности и ответственности матери зависит здоровье еще нарождённого малыша.

Лабораторная диагностика герпеса

Лабораторная диагностика герпеса проводится для выявления вируса простого герпеса (ВПГ). Инфекция ВПГ может вызывать небольшие болезненные пузырьки на коже или слизистых оболочках горла, носа, полости рта, уретры, анального отверстия и влагалища. Инфекция герпеса может вызвать всего одну вспышку герпетических высыпаний, однако в большинстве случаев инфицированный испытывает периодические рецидивы.

Существует два вида ВПГ.

ВПГ 1-го типа вызывает пузырьковый лишай (его также называют лихорадкой) на губах. ВПГ-1 обычно передается через поцелуи или совместное использование столовых принадлежностей (ложек или вилок) с человеком, имеющим герпетические высыпания на губах. ВПГ-1 также может вызывать высыпания в области гениталий.

ВПГ 2-го типа вызывает пузырьковые высыпания в области гениталий (генитальный герпес), поражающие пенис или влагалище. ВПГ-2 также вызывает инфекцию герпеса у новорожденных, которые появились на свет в процессе родов естественным путем от женщин, имеющих генитальный герпес в активной фазе. ВПГ-2 обычно передается половым путем. Иногда ВПГ-2 может вызывать герпес губ.

В редких случаях ВПГ может поражать другие части тела, например, глаза или мозг.

Анализы на герпес чаще всего проводятся в случае высыпаний в области гениталий. Иногда для исследований могут браться пробы спинномозговой жидкости, крови, мочи или слез. Для того чтобы выяснить, вызваны ли высыпания вирусом простого герпеса, проводятся различные исследования.

Вирусологический посев. Образцы клеток или жидкости из герпетических язвочек собираются на ватный валик, и производится выделение герпеса на культуре клеток. Вирусологический посев – лучший метод выделения инфекции генитального герпеса, однако зачастую этот метод диагностики не позволяет обнаружить вирус, даже если он присутствует (ложноотрецательный результат).

Выявление антигена вируса герпеса. Берется соскоб образцов клеток из свежих пузырьков, который затем помещается на предметное стекло микроскопа. Это исследование выявляет маркеры (которые называются антигенами) на поверхности клеток, инфицированных вирусом герпеса. Это исследование проводится совместно с посевом на культуре клеток, или вместо него.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Исследование методом ПЦР может проводиться на образцах клеток или жидкости из язвочек, а также на образце крови, либо спинномозговой жидкости. ПЦР выявляет генитический материал (ДНК*) ВПГ. Это исследование может определять, какой именно тип вируса, ВПГ-1 или ВПГ-2, присутствует в организме тестируемого. Для метода ПЦР редко используют соскобы с высыпаний, а наилучшим объектом исследования считается спинномозговая жидкость, особенно в случаях, когда существует подозрение, что герпес поражает мозг или ткани вокруг него.

Анализы на антитела к герпесу. Анализы крови могут выявить антитела, вырабатываемые иммунной системой для борьбы с инфекцией герпеса. Тесты для выявления антител к герпесу время от времени проводятся, однако, они не так точно, как вирусологические посевы, позволяют определить причины высыпания. Анализы на антитела не показывают разницы между инфекцией герпеса, активной на данный момент, и инфекцией герпеса, которая была активной в прошлом. Поскольку должно пройти некоторое время с момента инфицирования прежде, чем появятся антитела к герпесу, если вы заразились недавно, велика вероятность того, что результаты анализа будут ложноотрицательными. Некоторые анализы крови могут определять различие между ВПГ-1 и ВПГ-2.

Принято считать, что примерно половина взрослого населения Украины имеют антитела к герпесу.

Инфекцию герпеса невозможно вылечить. Однажды заразившись, вы останетесь носителем вируса до конца жизни. Он «прячется» в нервных клетках, и у некоторых людей вызывает больше рецидивов, чем у других. Повторные вспышки заболевания могут быть спровоцированы стрессом, усталостью, солнечным светом, или другой инфекцией, например, простудой или гриппом. Лекарства могут облегчить симптомы и уменьшить их продолжительность, однако, не могут раз и навсегда вылечить человека от этого заболевания.

Одна из разновидностей вируса герпеса (под названием вирус ветряной оспы) вызывает ветряную оспу и опоясывающий лишай.

Масштабы проблемы

Главная проблема заключается в том, что излечиться от многих типов герпесной инфекции невозможно. Годами люди болеют, не зная об этом. В это время болезнь клинически не проявляется, но поражает клетки органов и слизистых, ослабляет иммунитет. На медицинских семинарах ученые выдвигают теорию о том, что пациенты, длительно болеющие герпесвирусами, в большей степени подвержены онкологическим заболеваниям. Опасно болеть ВПГ (первый и второй тип) или ЦМВ (пятый тип) беременным женщинам. Если вирус проникнет через плацентарный барьер, плод может погибнуть или родиться с тяжелыми патологиями.

Какой анализ на герпес лучше

В современной практике применяют несколько методов определения ВПГ:

• Посев с генитальных мазков на клеточной культуре с последующим микроскопическим изучением полученных результатов.
• Реакция иммунофлюоресценции показывает наличие вируса по реакции тестовых антител.Основа исследования – сыворотка крови.
• Анализ ПЦР – лаборанты выделяют фрагменты ДНК вируса. В качестве биоматериала для исследования используются: соскоб из урогенитальной зоны, утренняя моча, слюна, сыворотка крови.
• ИФА — иммуноферментный анализ. Исследуется сыворотка крови.

Для повышения достоверности анализа рекомендуется использование не одного, а нескольких методов одновременно или проведение повторных исследований. Это связано с поведением вируса в организме, в частности, в крови ВПГ можно обнаружить лишь спустя несколько недель после предполагаемого заражения. Специфические антитела появляются в разной последовательности и в разные фазы болезни – IgM появляется на 5 день после инфицирования и достигает пика к 20 дню, IgG определяется с 14-го дня, IgA – в более поздние сроки. Сочетание антител показывает степень активности вируса и его динамику, поэтому анализ проводят интервально – через 10–12 дней.

Какие анализы сдают

Применяемые сегодня методы диагностики герпесвируса позволяют использовать для исследований разные виды биологического материала.

Этот материал можно получить при разновидностях болезни, проявляющихся сыпью, — вирус простого герпеса (как генитальный, так и с локализацией на губах), опоясывающий лишай, ветряная оспа.

Для выявления ВПГ 2 делают соскоб с пораженного участка кожи или урогенитальный мазок. Для диагностики типа 1 можно использовать слюну.

У новорожденных детей для подтверждения наличия в организме генитального герпеса берут соскоб с поверхности миндалин, мочу и содержимое везикул.

У новорожденных детей для подтверждения наличия в организме генитального герпеса берут на анализ мочу.

В редких случаях вирус обнаруживают в спинномозговой жидкости ребенка. Необходимость анализа и его вид определяет врач с учетом индивидуальных особенностей.

Полимеразная цепная реакция — ПЦР

Так называется метод молекулярной биологии, позволяющий многократно увеличить концентрацию фрагментов ДНК возбудителя в пробе с помощью клонирования (амплификации), что облегчает обнаружение вируса.

Материалом для теста ПЦР могут служить любые ткани организма: соскоб с места высыпания, образец мочи, слюны и др. Метод прост, доступен и позволяет быстро выявить вирус даже в случае крайне низкой его концентрации.

Недостатком метода ПЦР является невозможность получения ретроспективных сведений об инфекции, тест позволяет лишь подтвердить или опровергнуть присутствие в организме данного типа герпесвируса.

Материалом для теста ПЦР может служить образец слюны.

Иммуноферментный анализ — ИФА

Иммунная система в ответ на появление вируса вырабатывает специфические белковые антитела (иммуноглобулины, Ig), которые не обнаруживаются, если не было заражения. На выявлении антител построен наиболее информативный диагностический метод — тест ИФА, обладающий высокой чувствительностью и специфичностью. Для исследования используют венозную кровь, которую пациент сдает утром натощак.

Первый вариант подтверждает наличие или отсутствие в крови иммуноглобулинов двух классов, их разные сочетания позволяют отличить первичное заражение от рецидива хронической инфекции.

Вторая методика основана на оценке количества антител. Понятие «титр», используемое при этом, не подразумевает точного подсчета молекул антител, а только указывает на их концентрацию. Высокий титр говорит о позитивном результате и чаще всего означает рецидив болезни, низкий титр антител позволяет предположить инфекцию в прошлом.

Метод ИФА не позволяет с высокой достоверностью отличить первичную острую фазу инфекции от рецидива.

Для проведения иммуноферментного анализа используют венозную кровь, которую пациент сдает утром натощак.

Поскольку схемы начального и повторного лечения герпесвируса могут отличаться, требуется параметр, позволяющий отсечь все сомнительные результаты, такую возможность дает специально разработанный показатель — авидность антител.

Авидность означает прочность связи молекулы иммуноглобулина и антигена. Первичная инфекция характеризуются низкой авидностью. Высокое значение этого параметра показывает, что организм дает иммунный ответ на вторичное попадание инфекции.

Анализ урогенитального мазка

Это исследование биологического материала в лаборатории с использованием микроскопа. С помощью анализа естественных выделений и клеток эпителия урогенитального тракта выявляют генитальный герпес (ВПГ 2). Диагностическое исследование мазка применяется как в мужской урологии, так и в гинекологии.

Исследование флоры мазка не всегда дает достоверную информацию о типе вируса, для постановки точного диагноза материал мазка подвергается тесту ПЦР.

С помощью анализа естественных выделений и клеток эпителия урогенитального тракта выявляют генитальный герпес.

Культуральный метод

Этот способ отличается от анализов ПЦР и ИФА тем, что выявляются не косвенные признаки наличия герпеса, а непосредственно сам вирус. Диагностика построена на способности этого возбудителя существовать и размножаться только в живых клетках. В качестве биоматериала используется содержимое пузырьков сыпи, которое помещают в питательную среду (чаще всего используют эмбрион курицы) и наблюдают последствия.

Культуральный метод относится к точным и надежным способам диагностики. Недостатком его является большая длительность, которая в случае герпеса достигает 2 недель.

ПРЦ-исследование, что это такое?

Анализ на ПЦР заключается в копировании ДНК и РНК возбудителя в лабораторных условиях. Так как основным хранилищем генетической информации является ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота), образованная 2 нитями, соединенными нуклеотидами, именно при множественном копировании (синтезе) этой кислоты можно установить наличие патогенного организма, если речь идет о бактерии.

Бактерии имеют свою собственную оболочку, защищающую их от внешней среды, которая нередко является агрессивной по отношению к последним. У вирусов же нет собственной оболочки (у некоторых представителей имеется нечто похожее на оболочку), а информацию в себе несет не ДНК, а РНК (рибонуклеиновые кислоты).

РНК устроены таким образом, что они встраиваются в цепи ДНК организма-переносчика и меняют их, позволяя проникать в клетки и жить за счет организма. Грубо говоря, бактерии и вирусы оставляют «отпечатки» своими ДНК и РНК, которые и выявляет анализ ПЦР. Эти «отпечатки», как и отпечатки пальцев, являются уникальными для каждого возбудителя. Поэтому ПЦР позволяет выявить заболевание на любых этапах, даже если развитие патогена происходит бессимптомно.

До широкого внедрения ПЦР в гинекологии и урологии на ИППП широко использовались методы:

• микроскопия — окрашенные и неокрашенные препараты исследуются через микроскоп. Метод очень завязан на опытности лаборанта. Таким методом хорошо выявляются бактерии, имеющие большой размер (гарднереллы, кандиды, трихомонады, гонококки);
• бактериология — метод заключается в выращивании возбудителей инфекции на питательном агаре, идентификации возбудителя и определения чувствительности его к антибиотикам. Долгое время считался «золотым стандартом». К минусам относят необходимость быстрой доставке материала в КДЛ (клинико-диагностическая лаборатория), сроки выращивания и выяснения чувствительности к группам антибактериальных препаратов (как правило, 5-7 суток);
• иммуноферментный анализ — Определение антител организма, возникающих в ответ на внедрение антигена возбудителем инфекции. Из плюсов стоит отметить возможность определения стадии заболевания (острая стадия сопровождается наличием IgG в сыворотке крови, хроническая – IgM.) К минусам относится невозможность определения у людей с ослабленным иммунитетом, а также специфичность ИФА. Другими словами, при наличии только результата иммуноферментного анализа, невозможно было выставить диагноз, а можно было только определить, что организм борется с какой-либо инфекцией.

Последствия заражения герпесом

Характерная особенность вируса в том, что данная инфекция не выводится современными препаратами из организма, но врачи могут заметно облегчить его течение или погасить инфекцию на время, что особенно важно в период беременности. Недавние научные исследования показали, что герпес совсем не безобиден, как считалось ранее.

Недавние научные исследования показали, что герпес совсем не безобиден, как считалось ранее. Деятельность вируса в организме может вызвать тяжелейшие последствия:

• самопроизвольное прерывание беременности (выкидыш) и преждевременные роды;
• замирание беременности, повышение младенческой смертности на 50%;
• патологии глаз и головного мозга у плода;
• при одновременном инфицировании вирусом папилломы значительно увеличивается вероятность развития рака шейки матки;
• повышается возможность активации ВИЧ-инфекции у вирусоносителей.

Инфекция включена в группу потенциально опасных для плода инфекций (TORCH), поэтому обнаружение в крови будущей матери специфических иммуноглобулинов (IgM. IgG и IgA) служит основанием для консультации у врача на предмет возможности сохранения беременности.