Серологическое обследование: что это и как оно проводится

Результаты анализа крови RW

После того как осуществлен RW анализ крови, расшифровка результатов производится врачом, отправившим на обследование.

Изучая RW анализ крови, что означает написанное заключение простому пациенту непонятно. Положительная реакция может иметь 4 стадии. В зависимости от ее выраженности в результате указывают:

• «++++» – гемолиз полностью отсутствует, организм имеет большое количество антител для борьбы с возбудителем сифилиса;
• «+++» – положительная реакция с длительной задержкой гемолиза;
• «++» – задержка гемолиза в отдельной его части;
• «+» – сомнительный результат, требует повторного обследования.

Об отрицательной реакции говорит полное отсутствие задержки гемолиза в исследуемом образце. В таком случае можно утверждать, что пациент здоров. Если подобный результат получается после проведенного курса лечения, спустя определенное время исследование повторяют для исключения рецидива заболевания.

Положительная реакция Вассермана

Полученный положительный результат в большинстве случаев свидетельствует о сифилисе.

Подобное явление наблюдается при различных формах болезни:

Как утверждают специалисты, существует и ряд других патологий, при развитии которых результат будет положительным. В связи с этим, чтобы не впадать в панику после получения результата анализа, необходимо знать, при каких заболеваниях реакция Вассермана положительная.

• туберкулез;
• волчанка;
• малярия;
• вирусные инфекции;
• лептоспироз;
• пемфигус;
• новообразования различной локализации.

Ложноположительная реакция Вассермана

Антитела начинают вырабатываться в организме после попадания в него кардиолипина. Этот антиген не свойственен организму человека, однако при некоторых нарушениях и заболеваниях его появление становится возможным. В результате при отсутствии возбудителя сифилиса в организме обследуемого результат все равно будет положительным (ложноположительная реакция).

Как показывают врачебные наблюдения, ложноположительная реакция Вассермана, причины данного явления чаще связаны со следующими факторами:

• перенесенная пневмония;
• заболевания печени;
• болезни крови;
• период беременности;
• нарушение алгоритма лабораторного исследования.

Отрицательная реакция Вассермана

Об отрицательном результате говорят когда гемолиз происходит полностью, без задержек. Когда проводится экспресс-анализ крови на сифилис, в таком случае из-за отсутствия антител в образце крови пациента связывания с антигеном не происходит, комплекс не образуется. На основании микроскопии делается вывод. Кроме того, необходимо учитывать и время проведения теста. В первую неделю болезни реакция Вассермана будет отрицательной из-за недостаточной концентрации антител в крови.

Ложноотрицательный результат может наблюдаться у пациентов с сифилисом до 17-го дня с момента заражения. Как показывает статистика, и на 5-6-й неделе болезни только у 25% больных результат будет достоверным. Целесообразно проводить исследование не раньше, чем на 6-7-й неделе с момента предполагаемого заражения.

В связи с неспецифичностью реакции Вассермана в качестве альтернативы чаще используют экспресс метод диагностики сифилиса и следующие лабораторные исследования:

• РИФ;
• РПГА;
• ИФА.

Методы диагностики

Чаще всего в лабораториях серологическая диагностика представлена следующими иммунохимическими серореакциями:

• реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
• иммуноферментный анализ (ИФА);
• реакция непрямой гемагглютинации (РНГА);
• реакция связывания комплемента (РСК).

Эти виды исследования относятся к сложным серореакциям и обладают значительными преимуществами перед остальными. Они проводятся крайне быстро, имеют высокую точность диагностики болезней и не требуют длительной подготовки: от пациента требуется только сдать анализ венозной крови.

Иммунофлюоресцентная реакция РИФ

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), или анализ Кунса – метод экспресс-обнаружения антигенов патогенного агента в биоматериале пациента. Для проведения РИФ используется специальный краситель – флюорохром, способный светиться под люминесцентным микробиологическим микроскопом. Флюорохром добавляют в диагностическую сыворотку со строгим соблюдением концентрации, иначе реакция может показать ложные результаты. Иммунофлюоресцентная реакция бывает двух видов: прямая и непрямая.

Прямая реакция Кунса выявляет только антигены возбудителя. Для их определения в биоматериал добавляют диагностическую сыворотку, состоящую из антител и флюорохрома. Антигены, находящиеся на клеточной стенке возбудителя, связываются с окрашенными антителами. Врач лабораторной реакции рассматривает предметное стекло под микроскопом и видит ярко-зеленое свечение. Типичным примером такой реакции является выявление хламидий, контрастированных синькой Эванса.

Непрямая РИФ (РНИФ) определяет антигенно-антительные комплексы. Для этого врач последовательно добавляет в образец сначала немеченые иммуноглобулины, чтобы они связались с антигенами. Затем к образованным иммунным комплексам добавляется новая сыворотка, содержащая уже меченные красителем антитела к недавно образовавшимся комплексам. Наиболее часто прямая реакция используется для диагностики вирусных болезней.

Единственным недостатком данных реакций является некоторая степень субъективизма при учете результатов: одна и та же интенсивность свечения иногда расценивается врачами по-разному, что в итоге приводит к ложным данным лабораторного обследования.

Реакция непрямой гемагглютинации РНГА

Для проведения исследования используются красные клетки крови – эритроциты, на поверхности которых расположены антигены или антитела. Сыворотка носит название антигенного или антительного эритроцитарного диагностикума. Диагностикум добавляют к исследуемой крови, затем наблюдают за реакцией. При присоединении этих эритроцитов к антигенам или иммуноглобулином крови образуются комплексы, а красные кровяные клетки начинают выпадать в осадок. При отрицательном анализе эритроциты скапливаются в виде небольшого пятна в виде пуговицы. Если же на дне пробирки или планшетки образовался осадок с фестончатыми краями в виде зонтика, то реакция считается положительной.

Сложность в проведении этого серологического теста заключается в необходимости точного приготовления эритроцитарного диагностикума и строгого соблюдения концентраций используемых компонентов.

Иммуноферментный анализ ИФА

Метод иммуноферментного анализа считается самой точной, специфичной и чувствительной серореакцией. Учет результатов ИФА автоматизирован, а человеческий фактор и субъективная оценка данных исключена. Точность результата достигает 98%, а при повторном исследовании – 100%. ИФА используется для диагностики инфекций, передающихся половым путем, ВИЧ, вирусных гепатитов A, B, C, D, E, TORCH-инфекций и множества других заболеваний.

Существует более десяти модификаций данного анализа (прямой, непрямой, неконкурентный, твердофазный и т. д.), но все они имеют особые, характерные особенности диагностики, но схожий принцип проведения. Фазы иммуноферментных серологических реакций включают в себя создание комплекса антиген-антитело, к которому добавляют ферменты, играющие роль метки. Затем исследуемый материал располагают на специальный планшет, помещают в автоматизированную систему и начинают поиск комплексов, меченых радионуклидами. Анализатор выявляет святящиеся метки, измеряет оптическую плотность и степень свечения иммунных клеток, а затем выдает результат анализа.

Расшифровка результатов исследования

После забора крови и проведения исследования, специалист сначала выявляет в организме человека наличие инфекционного или вирусного заболевания, а затем, исходя из колличества антител, определяет степень развития заболевания. Если проведен серологический анализ крови, расшифровка которого показывает нулевое содержание антител, значит, организм не инфицирован. Но если содержание антител немного превышено, вероятнее всего, вирусное или инфекционное заболевание имеет место быть. Но помним, что необходимо проведение повторного анализа.

Определение, сущность и применение

Серологическое исследование — это метод лабораторной диагностики, основанный на изучении реакции антител в крови человека на определенную инфекцию. Данный метод позволяет определить наличие или отсутствие антител в организме, а также их количество и тип.

Сущность серологического исследования заключается в том, что после контакта с патогенным микроорганизмом (бактерией, вирусом и др.) в организме начинается активация иммунной системы. В ответ на инфекцию организм начинает производить антитела — особые белки, направленные против данного возбудителя.

Серологическое исследование позволяет выявить наличие антител в крови пациента. По типу антител и их количество можно сделать предположение об актуальности или перенесенности определенной инфекции. Например, уровень антител IgM указывает на активную инфекцию, а антитела IgG свидетельствуют о перенесенной инфекции или наличии иммунитета.

Применение серологического исследования широко используется в медицине для диагностики и контроля инфекционных заболеваний. С помощью данного метода можно обнаружить не только вирусы и бактерии, но и другие патогены, такие как паразиты и грибы.

Серологическое исследование также применяется для выявления специфического иммунного ответа на введение вакцин и мониторинга эффективности иммунизации. Кроме того, данный метод используется в научных исследованиях и эпидемиологических исследованиях, позволяя изучать распространение инфекций в определенных популяциях.

Расшифровка анализа

Все серологические анализы крови на сифилис делят на две большие группы: неспецифические (это анализ крови RW) и специфические (анализы РНГА, РИФ, ИФА, РИБТ).

• Неспецифические тесты дают положительный результат только когда человек болен, а после выздоровления они будут давать отрицательный результат.
• Специфические тесты позволяют определить в крови человека антитела к болезни. Они могут давать положительные результаты и после излечения, поэтому их редко используют в качестве самостоятельных диагностических тестов.

Чтобы получить максимально точные результаты обычно используют несколько разных тестов, тогда расшифровка анализа крови на сифилис занимает немного больше времени, но и результативность становится выше.

Реакция Вассермана или RW

Реакция Вассермана или RW может показать положительный результат примерно на 5-8 неделе после заражения, но у некоторых больных это происходит позже. По мере поступления возбудителей в кровь титр ее возрастает. Максимума он достигает при вторичном свежем сифилисе. Затем происходит постепенное снижение титра антител, а при поздних формах заболевания реакция Вассермана нередко бывает отрицательной.

Если анализ показывает резкое снижение титра антител во время лечения, то это свидетельствует о его эффективности. Обычно результат расшифровки анализа крови на сифилис выдают в виде цифры: 4 + – резко положительный, 3+ – положительный, 2+ или 1+ слабоположительный или сомнительный, и значок «–» обозначает отрицательный результат анализа.

Главным недостатком анализа RW является его недостаточная специфичность. Он достаточно часто дает ложноположительные результаты у пациентов с другими заболеваниями. Например, такой анализ может быть положительными у пациентов с разнообразными коллагенозами (красной волчанкой, склеродермией, ревматоидным артритом и т.д.), некоторыми инфекционными заболеваниями, например проказой, мононуклеозом, малярией, корью и др., а также с заболеваниями печени, злокачественными новообразованиями, инфарктами миокарда. Ложноположительные результаты бывают и у людей, злоупотребляющих алкоголем и наркотиками, а также у абсолютно здоровых людей. Поэтому при получении положительного анализа на сифилис обычно рекомендуют провести дополнительные исследования при помощи трепонемных тестов.

Метод иммуноферментного анализа

К трепонемным тестам относится ИФА или метод иммуноферментного анализа. При расшифровке анализа крови данным методом можно получить информацию об антителах к сифилису, а также об их титре и принадлежности к определенному классу иммуноглобулинов.

Чтобы получить максимально точный результат анализа на сифилис рекомендуется проводить один нетрепонемный тест (RW) и два трепонемных. Если все три анализа дадут положительный результат, то можно говорить о наличии заболевания у пациента.

Преимущества серологии

Высокая чувствительность к возбудителям инфекции сделали серологические анализы самыми востребованными по всей планете. Обширный перечень определяемых антигенов пополняется с каждым годом, что совершенствует серологию, обновляет ее поисковый список. Быстрая исполнительность анализов – от 2 минут, позволяет максимально рано определить причину болезни. Для постановки диагноза достаточна маленькая доза крови – до 10 мл. Возможность мониторинга течения заболевания делают СИ способом дополнительного обследования во время лечения.

Минусов серологические исследования практически не имеют. На данный момент перечень исследований ограничен базой антител и антигенов, которые открыты наукой и изучены. Новые вспышки вирусных болезней пополняют объекты наблюдения эпидемиологов, инфекционистов, поэтому появление очередного вида вируса только способствует развитию серологии.

Существенная сложность, отличающая серологические анализы, это высокие требования к лаборантам и врачам-вирусологам. От исполнителя анализа требуется внимательность и точность при совершении реакций и подсчете результатов. А ученые должны точно описать и исследовать свойства и характерные особенности изучаемых объектов, на основании которых построить алгоритм для младшего медицинского персонала.

Серологические исследования – это новейший метод изучения сыворотки крови, направленный на выявление специфичных антител и антигенов. СИ рассматривают широкий перечень исследуемых возбудителей, передающихся воздушно-капельным, урогенитальным, гематологическим путем. Серологические анализы могут быть выполнены в кратчайшие сроки и представить в расшифровке не только идентифицированного возбудителя, но и наиболее эффективное лечение. СИ также позволяют наблюдать за течением заболевания и определять его тяжесть. Серология широко используется для определения группы крови, резус-фактора, гормональных сбоев, аллергий.

Методы проведения СИ

Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:

1. Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
2. Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
3. Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
4. Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
5. Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
6. Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
7. Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
8. Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
9. Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
10. Нейтрализация вирусов родными антителами.
11. Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.

В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.

Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.

Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.

Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы

Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.

Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.

Преимущества и недостатки метода

Все серологические методы имеют некоторые преимущества и недостатки. Большим плюсом является довольно высокий уровень достоверности, но одновременно с этим нельзя исключать и перекрестные реакции. В том случае, если у человека существует какая-либо аутоиммунная патология и в крови циркулирует большое количество разнообразных иммунных комплексов, то возможны и ложноположительные реакции, поэтому о стопроцентной достоверности говорить не приходится.

В том случае, если человек болеет или недавно переболел похожим заболеванием, или был вакцинирован от инфекции, возбудитель которой имеет родственные антигены, то может выйти ложноположительная или перекрестная реакция.

Большим плюсом является факт, что серологический анализ крови выполняется быстро. В отличие от бактериологического исследования, когда колониям микроорганизмов необходимо для роста несколько дней, а то и недель, серологические анализы крови готовятся в течение суток.

Как правило, эти исследования стоят недорого и вполне доступны всем категориям населения.

Пожалуй, самым важным недостатком является невозможность в ряде случаев различить, когда человек болен, а когда он здоров, но в его крови остались циркулировать антитела после выздоровления. Примером может служить хеликобактерная инфекция, которая является причиной язвы желудка. После ее полного излечения у пациента остаются антитела в течение 2 лет, и они будут выявляться при расшифровке результатов, как и в случае повторного заражения, так и в том случае, если инфекция отсутствует. Поэтому серологический способ диагностики обязательно должен дополняться другими методами.

В случае, если человек заболел впервые, то проводить исследования необходимо не раньше, чем через 2-3 недели после начала заболевания, поскольку в более ранний период антитела могут просто не выработаться. Поэтому все серологические методы исследования не могут считаться способами быстрой постановки диагноза, в первые дни после заболевания.

Наконец, серологические исследования являются прицельными: реакции проводятся на предполагаемые инфекции. Нельзя просто сдать кровь, чтобы «серология показала какую – нибудь» болезнь. И в этом смысле обычный, рутинный посев на питательные среды имеет большое преимущество.

Серологические реакции

Серологическое исследование на гепатит, ВИЧ, сифилис: особенности

Сифилис

При проведении анализа на сифилис специалисты ищут белки, отвечающие за поступление в человеческий организм возбудителя инфекции — речь идет о трепонеме бледной. В качестве биологического материала в этом случае выступает сыворотка крови.

Вирусные гепатиты — серьезные инфекционные заболевания, опасность которых заключается в том, что они достаточно долгое время могут жить в организме, никак себя не проявляя. Выявить заболевание в ранней фазе, когда оно лучше поддается лечению, можно проведя анализ на маркеры — маркеры появляются в крови после перенесенного заболевания или введения вакцины.

Рекомендуем к просмотру медицинский сайт https://tabletix.ru/ . На сайте найдете полезную информацию, врачебные мнения.Если вы наблюдаете один или несколько из симптомов, указанных ниже, стоит задуматься о сдаче серологического анализа:

• рвота;
• плохой аппетит или его отсутствие;
• беспричинное бессилие организма, переутомление;
• желтоватый цвет лица;
• изменения цвета кала и мочи.

ВИЧ

Если показал положительный результат, это не говорит о том, что пациент инфицирован СПИДом. Если заражение произошло недавно (не более двух месяцев назад), наличие антител не позволяет определить факт развития заболевания. Назначается повторное исследование.

Серологический анализ крови — важнейший метод исследования, основное назначение которого заключается в оперативном выявлении вирусов, инфекций, микробов в организме.

Этот уникальный лабораторный «инструмент» позволяет определить любое заболевание, которое является следствием угнетения иммунитета, поэтому не ленитесь, а регулярно сдавайте анализ, чтобы иметь возможность вовремя выявить болезнь и быстро от нее избавиться.

Серологический анализ крови представляет собой фундаментальный метод исследования, осуществляемый в целях быстрого и достоверного выявления микробов, инфекций и вирусов в организме человека. Помимо этого благодаря данному методу можно определить весь перечень существующих болезней, возникших в результате понижения иммунитета.

За счет серологического анализа осуществляется изучение забранной у пациента крови на ВИЧ, сифилис и иные опасные недуги.
К тому же исследование необходимо в случае утверждения группы крови пациента и для определения специфичности белков.

Как отмечалось ранее, анализ рекомендован для диагностирования инфекционных недугов и установления стадии течения воспалительного процесса. Благодаря серологической химической реакции можно определить уровень взаимодействия антигенов и антител, отвечающих за результат.

Данный анализ применяется:

1. При определении числа антител, борющихся с возбудителем заболевания: в ходе анализа сыворотку крови смешивают с антигеном возбудителя болезни, после чего смотрят на происходящую реакцию.
2. Обратная ситуация – развивающуюся инфекцию обнаруживают за счет находящихся антигенов, выявляемых путем дополнения в кровь антител.
3. В случае установления группы крови.

При плохой свертываемости крови и в случае гиперкоагуляции могут произойти опасные последствия, связанные с сердечной деятельностью.

Необходимость в серологических исследованиях возрастает, когда у пациента есть подозрения на наличие половой инфекции и других заболеваний. В полученном результате пройденного анализа есть информация о наличии в крови антител к данному типу бактерий либо вирусов. Это болезни печени, корь, вирус иммунодефицита человека, герпес и др. В случае выявления антител доктор выносит заключение пациенту и определяет дальнейший курс терапии. Если есть необходимость, нужно будет пройти дополнительные исследования.

Забор материала осуществляется из локтевой вены. Анализ берется на голодный желудок с утра. Вместе с тем перед сдачей биохимического анализа на гепатит следует исключить из ежедневного рациона все овощи и фрукты, имеющие яркую окраску. Если потребуется подтверждение результатов готового анализа, можно назначить вторичное обследование без спецподготовки.

Использование серологических методов для диагностики сифилиса

В основе серологических лабораторных методов диагностики сифилиса лежит способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. С помощью серологических реакций в сыворотке (плазме) крови (или цереброспинальной жидкости) выявляют следы иммунного ответа на заражение, а именно антитела к антигенам бледной трепонемы, или же сами антигены.

Для того, чтобы установить специфический характер имеющихся клинических проявлений (т.е. что они являются следствием именно сифилиса) и, в дальнейшем, контролировать динамику патологического процесса, предложено большое количество серологических методов исследований. Эти же методы также широко применяют для скрининга населения.

В соответствии с действующими национальными руководствами и клиническими методическими рекомендациями, во многих странах мира при обследованиях населения с целью выявления больных сифилисом и при установлении клинического диагноза используются передовые серологические методы. Их применяют как при наличии клинических признаков болезни у пациентов, так и в латентные периоды.

Постановка серологических реакций — один из наиболее надежных методов диагностики сифилиса. Стандартизованные серологические реакции с регламентированной методикой постановки называются серологическими тестами на сифилис. Учитывая то, что почти все серологические реакции на сифилис в определенных условиях могут быть ложноположительными или ложноотрицательными, их следует ставить в комплексе и, при необходимости, в динамике.

Серологические реакции, которые используются для определения антител в сыворотке крови больного, отличаются друг от друга чувствительностью, специфичностью, сложностью постановки и стоимостью. Помимо классических методов, для эффективной серодиагностики сифилиса используются иммунологические тесты и технологии, получившие в 21 веке новый импульс к развитию.

Антитела выявляются различными иммунохимическими (серологическими) методами, среди которых осадочные реакции, иммуноферментный, иммунохемилюминесцентный, иммунохроматографический анализы, линейный иммуноблоттинг, исследование с применением проточной флюорометрии, технология иммуночипов и другие.

Серодиагностика (исследование с помощью серологических методов) применяется для:

• подтверждения клинического диагноза сифилиса,
• постановки диагноза скрытого сифилиса,
• контроля за эффективностью лечения, как один из критериев излеченности больных сифилисом,
• профилактики сифилиса (скрининговое обследование определенных групп населения с целью выявления патологии).

Интерпретация результатов серологического обследования: что означают полученные данные

Серологическое обследование является одним из методов, которые используются для диагностики инфекционных заболеваний. При этом результаты такого обследования могут быть представлены в различных форматах и иметь разные значения. Давайте разберем, что означают основные данные, получаемые в результате серологического анализа.

Антитела IgM: антитела класса IgM обычно появляются в крови в начальный период после инфекции. Их наличие может указывать на активную инфекцию или ранее перенесенную болезнь. Однако, уровень антител IgM может снижаться через несколько недель или месяцев, поэтому положительный результат на антитела IgM не всегда означает наличие инфекции в активной форме.
Антитела IgG: антитела класса IgG появляются в крови в более поздние сроки после инфекции и могут сохраняться на длительное время. Уровень антител IgG может служить индикатором ранее перенесенной инфекции или наличия иммунитета. Повышенный титр антител IgG может указывать на активную инфекцию или недавно перенесенное заболевание.
Свидетельство о вакцинации: серологическое обследование также может использоваться для подтверждения наличия иммунитета после вакцинации

Если обследование показывает наличие высокого уровня антител, это может указывать на успешную вакцинацию и наличие иммунитета.

Положительный или отрицательный результат: важно отметить, что интерпретация результатов серологического обследования не всегда является однозначной. Иногда результаты могут быть позитивными, но это не всегда означает наличие активной инфекции.

Положительный результат требует дополнительных обследований, включая клиническую картину и анамнез пациента.

Интерпретация результатов серологического обследования должна осуществляться врачом на основе клинической картины и дополнительных обследований. Помните, что результаты серологического анализа могут быть ложноположительными или ложноотрицательными, и только опытный специалист сможет правильно оценить их значение.

Сущность методов, их преимущества и недостатки

Существует несколько серологических методов диагностики, но принцип их применения сводится к одному – к реакции “антиген-антитело”. Это основывается на том, что антиген инфекционного возбудителя, если он есть в крови обследуемого, обязательно даст специфическую реакцию на соответствующее антитело в контрольной (диагностической) сыворотке крови. И наоборот, антитело, если оно есть в крови обследуемого, даст реакцию на контрольный антиген, содержащийся в диагностикуме лаборанта.

Серологические анализы имеют существенные достоинства в диагностике многих заболеваний, а именно:

• доступность и охват исследованиями широких масс населения,
• относительная простота методик,
• умеренная стоимость большинства исследований,
• быстрота выполнения анализа (три-пять рабочих дней).

Тем не менее, у серологических исследований имеются и некоторые недостатки, например, необходимость инвазивного вмешательства при заборе крови, а что существеннее – в некоторых случаях невозможность отличить уже перенесенную инфекцию от текущей болезни.

Итак, из серологических исследований крови выделяют следующие методики:

1. Реакция агглютинации (РА), чаще используется реакция не прямой, или пассивной агглютинации (РПГА). Основывается на поиске антигена (в данном случае, агглютиногена) в биологической жидкости пациента, или на поиске антител (агглютининов) в исследуемой сыворотке крови. Может применяться не только в диагностике инфекционных заболеваний, но и в определении ревматоидного фактора (РФ), а также в определении группы крови.
2. Реакция связывания комплемента (РСК).
3. Иммуноферментный анализ (ИФА).
4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

РПГА

РПГА выполняется следующим образом. Исследуется сыворотка крови пациента, в которой осуществляется поиск антигена или антител с помощью антительного или антигенного диагностикума, соответственно. При этом контрольные антитела или контрольные антигены фиксируются на эритроцитах барана или на частичках латекса размером не более 5-ти мкм. В том случае, если в крови выявляются искомые антитела или антигены, с контрольным диагностикумом происходит реакция агглютинации (склеивания), которую можно оценить визуально по наличию хлопьев или комочков в прозрачной среде диагностикума.

РСК

Отличие РСК заключается в следующем. Для поиска антител в исследуемой сыворотке крови к тому или иному антигену используется диагностикум, содержащий не только эритроциты барана, но еще и свободный комплемент. Комплемент- это белковый комплекс, способный активировать мембраноатакующий компонент. Эритроциты же сенсибилизированы собственными к ним антителами, поэтому здесь два пути развития событий. Первый – если антитела, допустим, к возбудителю коклюша у пациента в крови циркулируют, то система комплемента будет направлена на ликвидацию этих только что образовавшихся комплексов “антиген-антитело”, а эритроциты барана останутся нетронутыми. Гемолиза эритроцитов барана не произойдет – диагностикум останется прозрачным, с небольшим осадком на дне из эритроцитов барана. РСК положительная (гемолиза нет).

И второй путь – антител к коклюшу в крови пациента нет, тогда системе комплемента придется связать комплекс “антиген-антитело” на эритроцитах барана. В этом случае будет гемолиз эритроцитов барана, визуально это выглядит, как прозрачная однородная красно-оранжевая лаковая кровь. РСК отрицательная (гемолиз есть).

ИФА

Для проведения ИФА используются те же самые диагностикумы, но меченые ферментами (щелочная фосфатаза, пероксидаза и др). Таким образом, на положительные комплексы “антиген – антитело” формируется реакция, результат которой с легкостью можно визуально оценить на специфических тест-системах. Преимущество ИФА в том, что результат готов уже через несколько дней, и даже часов – это экспресс-диагностика (чаще применяется при экспресс диагностике ВИЧ – инфекции).

РИФ

РИФ отличается от предыдущих методик тем, что в последнем случае антитела к определенным возбудителям помечаются флюоресцентными веществами. При рассмотрении исследуемых образцов ткани пациента, обработанных мечеными антителами, в люминисцентном микроскопе образуемые комплексы “антиген – антитело” светятся, значит, реакция положительная.